普通引物合成

普通引物合成

    常规引物即纯粹由ATCG四个脱氧核糖核苷酸基团经有机合成等纯化学方法合成的引物。芊姿芊旗下的一道品牌,多年来不断坚持自主研发,开发出国际先进的高通量DNA合成仪、氨解仪、自动分液器、合成试剂等全流程仪器及原材料,智能化全程监控每一条引物的合成,确保为全球范围的客户提供高品质的引物。


服务特色

  • 可选择液体引物,无需稀释(浓度可选10P或100P),直接使用

  • 低突变率:低于1/1000

  • 快速发货:常规引物合成周期为24小时

  • 技术反馈:技术支持反馈时间保证1小时以内

  • 高度定制化:提供0.5-100 OD的规格(对一次性合成大量的引物可以96孔板或384孔板的形式进行发货)

  • 纯化方式多样:脱盐到HPLC等四种纯化方式任选



流程图 改色 一道版 V2.jpg



订购与咨询


您可以通过以下任意方式下单或咨询,工作时间我们保证在1小时内给您反馈:

1.  Email订购:下载我们的《引物合成订单》,填写完整后发送到syn@QianzIqian.com

2.  电话订购:您可以直接拨打电话400-618-6558联系我们经验丰富的工程师

3.  咨询:任何技术问题均可与我们在线QQ互动,或发送邮件到syn@QianzIqian.com


引物纯化方式如何选择

引物纯化方式.png

    C18柱脱盐:这是一种活性碳柱子,有人称其为简易反相柱,它对DNA有特异性的吸附,DNA可以被有机溶液洗脱,但不会被水洗脱,所以能有效地去除盐分。但是它不能有效去除比目的片段短的小片段。

    OPC:合成DNA寡核苷酸片段(Oligo)的最终产物上带有DMT。OPC纯化就是基于DMT与树脂的亲合力。Oligo上只有最后一个碱基带有DMT,其它碱基的DMT基团在逐步的合成过程中已被去除。因此,原则上只有真正所要合成的DNA片段末端有DMT,而短片段杂质末端无DMT。

    OPC柱中装有对DMT具有亲和力的树脂,所有合成产物吸附在OPC柱上以后,用稀的有机溶剂洗柱,带有DMT的片段吸附能力强,不易被洗脱,不带有DMT的片段吸附能力弱,被洗脱。然后用三氟乙酸TFA脱去Dmt基团,再用浓一点的有机溶剂洗脱DNA。这种方法的优点是快速,简易。但是其专一性吸附DMT能力有限,不免仍然有短片段带入的可能,特别是对长碱基的纯化效果不一定理想。长片段建议使用PAGE纯化。

    PAGE:它是依据DNA片段在变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时的迁移率不同来分离大小片段的。由于各分子所带电荷和大小不同,综合影响其在凝胶中的迁移速度,大片段迁移得慢,经过一定时间的电泳,大小片段会分开,然后停止电泳,剥离凝胶,置于荧光TLC板上在紫外灯下切割目的条带,浸泡碎胶,并从泡胶的盐溶液中回收目的DNA。优点是纯化效果很好、尤其是纯化长链效果更好、而且是可以直观看见DNA片段合成情况的质控环节。缺点是费人工、电泳及后处理过程中样品损失量大。

    HPLC:HPLC纯化是使用高效液相色谱的原理,对引物DNA进行纯化。该方法用于分离纯化或分析时能达到很高的纯度和灵敏度。在引物DNA的分析和纯化中,常用的有离子交换(ion-exchange)HPLC和反相(reverse-phase)HPLC。Reverse phase HPLC:纯度大于90%;ion exchange HPLC:纯度大于95%,可以有效的去除N-1短片段。HPLC纯化主要用于短链和修饰引物的纯化。该法的缺点是成本较高,批量生产效率不高。


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